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一般多肽保存和溶解指南;如何溶解多肽?如何保存多肽?

一般多肽保存和溶解指南;如何溶解多肽?如何保存多肽?

一般多肽保存和溶解指南

-------上海楚肽生物科技有限公司技术部

一、冻干多肽的保存

A. 冻干多肽产品可以在常温下避光运输,并可以在室温条件下保存几天或者至少一个星期,多肽性质是稳定的。在干燥低温的条件下,以-20摄氏度保存为最佳,若条件允许保存-80摄氏度可保存1-2年时间。

B. 当需要使用多肽时,应在开盖前将多肽产品升至室温;对保存-20摄氏度的产品。该过程需要1h甚至更长,因室温和包装大小而异。当打开盖子,水汽进入可能导致多肽凝缩而降低稳定性。一旦打开,应迅速称量完毕,并立即封闭以免潮解,亲水性的多肽尤应该注意。

二、多肽的溶解

A. 溶解多肽的第一个原则是用无菌的蒸馏水或去离子水(如果条件允许则用无氧水)。多肽溶液可能遇到细菌降解。为避免该现象的发生,多肽应溶解在无菌的蒸馏水中,或者用0.45或0.2µm孔径的滤膜过滤除菌。包含Cys、Met、Trp的多肽特别容易氧化,因此应该溶于无氧的水中。无氧水可以通过注入惰性气体(氮、氦、氩)减压除气得到。

B. 若多肽不溶于纯水,超声处理有助于打碎颗粒并增加溶解度。注意:超声处理会引起溶液发热和多肽降解。若多肽中包含多个碱性氨基酸,使用1~10%的乙酸水溶液;对于疏水性非常强的多肽,则使用50%乙酸。

C. 若多肽中含有大量酸性氨基酸,可用1~10%氨溶液或乙酸乙基**或重碳酸盐等挥发性的碱性缓冲液溶解。pH值在层析前必须调整。异丙醇和乙腈能溶解中等大小的肽。若肽要上柱,有机溶剂的量则必须很少,否则将严重影响滞留时间。

D. 若多肽因为含有Val、Leu、Met、Phe、Tyr、Ala等芳烃侧链而高度疏水,或为中性肽时,DMF或DMSO等膜变性剂的使用,有助于多肽的溶解。

a. 高浓度膜变性剂通过破坏多肽的二级结构而助溶。

b. 膜变性剂适于多肽分析液的制备,但可能会对其生物活性的研究工作造成干扰。

c. DMF是最佳变性剂(最高浓度可达30%),滴加至多肽溶解。

d.反相层析时,DMF将与洗脱液前峰一起流出,依进样量的多少,峰值可能很高。大多数肽能在大量DMF流出后几分钟内流出,若肽链很小,洗脱太早,多肽的量将降低。 返回搜狐,查看更多

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